ELISPOT斑點(diǎn)的特征

    “一個(gè)陽性細(xì)胞，對(duì)應(yīng)一個(gè)ELISPOT斑點(diǎn)”，這是ELISPOT檢測的理論前提。無數(shù)的實(shí)驗(yàn)也證明了這一點(diǎn)?，F(xiàn)有的抗體技術(shù)以及酶聯(lián)放大技術(shù)確實(shí)可以把單個(gè)細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的行為記錄下來，ELISPOT板上的每一個(gè)斑點(diǎn)就是好的證明。下面我們來看一看ELISPOT斑點(diǎn)的特征。

    圓形，有暈核結(jié)構(gòu)

    這是判定真假ELISPOT斑點(diǎn)的主要標(biāo)準(zhǔn)。ELISPOT斑點(diǎn)有

這種結(jié)構(gòu)可以從幾何學(xué)的原理得到很好的理解和解釋（如圖

1.2所示）。懸浮在ELISPOT板膜上的細(xì)胞，它分泌細(xì)胞因子

是沒有方向性的，均勻地向四面八方擴(kuò)散，如果擴(kuò)散到

ELISPOT板膜，就會(huì)被板膜上的包被抗體捕獲。在所有從細(xì)胞到斑膜的路徑中，有條路徑短，這就是位于細(xì)胞正下方到板膜的垂直距離。路徑越短，擴(kuò)散中耗散損失就越少，到達(dá)該點(diǎn)的細(xì)胞因子就越多，將來顯色的時(shí)候顏色就越深。以垂直距離點(diǎn)為圓心，向外畫一系列的同心圓，同心圓的直徑越大，細(xì)胞因子擴(kuò)散的距離就越長，耗散越多，到達(dá)的細(xì)胞因子就越少，顏色就越淺。當(dāng)超過一定距離之后，擴(kuò)散到達(dá)的細(xì)胞因子就減少到背景水平了，這就是斑點(diǎn)的邊界。

    大小不均一，正態(tài)分布