只需自備標(biāo)準(zhǔn)品、抗體對(duì)和HRP/AP檢測(cè)試劑,輕松制備ELISA。
Innova Biosciences FlexLISA?主要是用于開(kāi)發(fā)和優(yōu)化雙抗體夾心ELISA,將抗體對(duì)分別與Streptavidin和HRP/AP標(biāo)記,然后將樣本和標(biāo)記抗體對(duì)分別加入預(yù)包被Biotin 96孔板,室溫孵育1小時(shí),清洗后加入酶檢測(cè)試劑即可實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。
試劑盒組分
自備:標(biāo)準(zhǔn)品、抗體對(duì)和HRP/AP檢測(cè)試劑
實(shí)例數(shù)據(jù):
1. 使用LL-HRP標(biāo)記CRP檢測(cè)抗體并使用CRP標(biāo)準(zhǔn)品做校準(zhǔn)曲線的ELISA檢測(cè);
檢測(cè)試劑:TMB;
標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合:線性方程(A)和4參數(shù)對(duì)數(shù)方程(B);
測(cè)定800,200和50 pg/ml CRP(C)的批內(nèi)%CV(n = 24)。
2. 使用LL-HRP和Ampliflu?Red(激發(fā)波長(zhǎng):530nm,發(fā)射波長(zhǎng):590nm)
作為檢測(cè)試劑對(duì)CRP的ELISA檢測(cè);
3. 使用LL-AP標(biāo)記CRP檢測(cè)抗體并使用CRP標(biāo)準(zhǔn)品做校準(zhǔn)曲線的ELISA檢測(cè);
檢測(cè)試劑:PNPP;
標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合:線性方程(A)和4參數(shù)對(duì)數(shù)方程(B);
測(cè)定800,200和50 pg/ml CRP(C)的批內(nèi)%CV(n = 24)。
4. 步驟:在鏈酶親和素標(biāo)記CRP捕獲抗體和HRP/AP標(biāo)記CRP檢測(cè)抗體存在下,耗盡CRP的人血清加到250pg/ml CRP并連續(xù)稀釋后加到透明的96條板狀板中;
制備已知量的CRP的標(biāo)準(zhǔn)曲線也加到板中。
TMB和PNPP分別檢測(cè)HRP和AP。
計(jì)算:擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過(guò)測(cè)量吸光度來(lái)確定添加到板中的樣品的CRP濃度。
結(jié)果:對(duì)于所有稀釋度,計(jì)算的CRP量在實(shí)際值的10%以內(nèi)。